壮观链霉菌菌种

冻存铜绿假单胞杆菌时，要先消化细胞，将细胞悬液收集至离心管中。1000rpm离心10分钟，弃上清液。沉淀加含保护液的培养，计数，调整至5×106/毫升左右。将悬液分至冻存管中，每管1毫升。将冻存管口封严。如用安瓿瓶则火焰封口，封口一定要严，否则复苏时易出现爆裂。贴上标签，写明细胞种类，冻存日期。冻存管外拴一金属重物和一细绳。按顺序降温，室温→4摄氏度（20分钟〕→冰箱冷冻室（30分钟）→低温冰箱（－30摄氏度1小时）→气态氮（30分钟）→液氮。注意操作时应小心，以免液氮冻坏。液氮定期检查，随时补充，不能挥发干净，一般30立升的液氮能用1～1.5月。将金黄色葡萄球在显微镜下排列成葡萄串状，金黄色葡萄球菌无芽孢、鞭毛，大多数无荚膜。壮观链霉菌菌种

大肠杆菌的培养：将保藏状态的菌种放入适宜的培养基中培养，逐级扩大培养得到纯而壮的培养物，即获得活力旺盛的、接种数量足够的培养物。菌种发酵有一般需要2-3代的复壮过程，因为保存时的条件往往和培养时的条件不相同，所以要活化，让菌种逐渐适应培养环境。菌种经过冷冻干燥后，生长延迟期较长，需连续两次继代培养才能正常生长。将菌种接种至一新鲜培养基上，每萌发一次即为一代，因此，当原始菌种复溶并转至新培养基内生长，即认为已传代一次，从菌种保藏中心获得的冷冻干燥的菌种为第0代，冷冻干燥的原始菌种开启后转种为第1代，直到第3代为工作菌种。菌种的传代次数（自原始菌种冻干粉起）不得超过5代。直接从冻存摇的菌甘油放了不少可能会抑制菌的生长，活力差，而且多余的甘油对细菌生长不利，经划板的菌株活力好，可以挑菌摇菌提质粒或者做表达用。叶生布勒担子酵母菌株铜绿假单胞菌存在的重要条件是潮湿的环境。

金黄色葡萄球菌的检验方法操作步骤：增菌培养法：(1)检样处理：按无菌操作取检样25g(ml)，加入225mL灭菌生理盐水，固体样品研磨或置均质器中制成混悬液。(2)增菌及分离培养：吸取5ml上述混悬液，接种于7.5%氯化钠肉汤或胰酪陈大豆肉汤50mL培养基内，36℃士1℃培养24h，转种血平板和Baird一Parker平板，36℃士1℃培养24h，挑取血平板上金黄色(有时为白色)菌落进行革兰氏染色镜检及血浆凝固酶试验。(3)形态：本菌为革兰氏阳性球菌，排列呈葡萄球状，无芽胞，无荚膜，致病性葡萄球菌菌体较小，直径约为0.5um～1um。

金黄色葡萄球菌的检验方法操作步骤：血浆凝固酶试验：吸取1：4新鲜兔血浆0.5mL，放入小试管中，再加人培养24h的金黄色葡萄球菌肉浸液肉汤堵养物0.5mL，振荡摇匀，置36℃士1℃温箱或水浴内，每半小时观察一次，观察6h，如呈现凝固，即将试管倾斜或倒置时，呈现凝块者，被认为阳性结果。同时以已知阳性和阴性葡萄球菌株及肉汤作为对照。直接计数方法6.2.1吸取上述1：10混悬液，进行10倍递次稀释，根据样品污染情况，选择不同浓度的稀释液1mL，分别加人三块Baird一Parker平板，每个平板接种量分别为0.3mL、0.3mL、0.4mL，然后用灭菌L棒涂布整个平板。如水分多不易吸收，可将平板放在36℃士1℃lh，等水分蒸发后反转平皿置36℃士1℃培养。金黄色葡萄球在自然界中无处不在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。

悬液保存法是铜绿假单胞菌混悬于适当溶液中进行保存的方法，蒸馏水保存法将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。糖液保存法将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。载体保存法将铜绿假单胞菌吸附在适当载体上进行干燥保存的方法，土壤保存法主要用于能形成孢子或孢囊的铜绿假单胞菌菌种的保藏。方法是在灭菌的土壤中加入菌液，立即在室温下进行干燥或使菌体繁殖后再干燥，然后冷藏或在室温下密封保存。保存用的土壤原则上以肥沃的耕土为宜，土壤需风干、粉碎、过筛和灭菌。金黄色葡萄球呈球形或稍呈椭圆形，直径1.0um左右，排列成葡萄状。叶生布勒担子酵母菌株

铜绿假单胞菌原称绿脓杆菌。壮观链霉菌菌种

枯草芽孢杆菌为接种微生物，对菲与苯并芘都可进行吸附或生物降解，48h液相PAHs浓度达到平衡时，微生物对菲消除了98％，对苯并芘消除85％；接种的样品48h吸附等温线均呈线形，能较好地符合线性方程；在接种微生物情况下，沉积物与土壤对菲和苯并芘吸附特征均发生较大变化，对菲的吸附量增大约35倍，而对苯并芘的吸附量却降低了2/3左右；未接种微生物的土壤和沉积物对菲解吸率为20％，接种的样品组为2.9％，而对苯并芘的解吸结果与菲相反，未接种的对照组为4％，接种的样品组为3％。脲酶属于土壤中研究得比较深入的一种水解酶类，枯草芽孢杆菌是对尿素在土壤中转化及尿素利用率有重大影响的。壮观链霉菌菌种

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